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    三種消毒劑檢測方法分析對比

    發(fā)布時間: 2018-10-22  點(diǎn)擊次數(shù): 2700次
      三種消毒劑檢測方法分析對比
      對三種消毒劑檢測方法戊二醛溶液,二氯異氰尿酸鈉溶液系滅枯草桿菌黑色變種芽孢的效果進(jìn)行了比較。結(jié)果, 用歐洲標(biāo)準(zhǔn)懸液定量殺菌試驗(yàn). 改良?xì)W洲懸液定量殺菌試驗(yàn)和載體浸泡定量殺菌試驗(yàn)檢測含戊二醛2% (g/m1)溶液殺滅枯草桿菌黑色變種芽化達(dá)消毒合格標(biāo)準(zhǔn), 作用時間分別為2.5.3.0,2.0 h。用前兩方法檢測含有效氯4 500 mg/L的二氯異氰尿酸鈉溶液及用載體方法檢測含有效氯l 000 mg/L該液殺滅枯草桿菌黑色變種芽孢達(dá)消毒合格標(biāo)準(zhǔn),作用時間分別為30,20.10 min。當(dāng)染菌片的芽孢懸液中增含小牛血清50%(ml/m1)時, 用載體方法檢測含有效氯5 000 mg/L的二氯異氰尿酸鈉溶液殺滅該芽孢達(dá)消毒合格標(biāo)準(zhǔn),作用時間近20 min, 與用歐洲標(biāo)準(zhǔn)懸液法檢測者(30 min)相近 表明三種方法檢測受有機(jī)物影響較小的戊二醛殺菌效果相差較小,檢測受有機(jī)物影響較大的二氯異氰尿酸鈉殺菌效果相差較大。后者可能與方法中含有機(jī)物多少有關(guān)。
      消毒劑檢測方法
      1、消毒劑檢測菌懸液與菌片的制備
      在歐洲標(biāo)準(zhǔn)懸液法和改良?xì)W洲懸液法中, 用含胰蛋白胨0,1% (g/m1) 和氯化鈉0,85% (g/m1) 的去離子水溶液(pH6 8~7 0), 將枯草桿菌黑色變種(ATCC9372)芽孢稀釋至規(guī)定含菌量的懸液。在載體法中, 用含蛋白胨0.1% (g/m1)的磷酸鹽緩沖液(PBS, pH 7.2~7,4)制成的枯草桿菌黑色變種芽孢懸液滴染1,0 cm×1,0 cm 布片, 制成菌片。
      2、消毒劑檢測中和劑選擇試驗(yàn)
      因懸液法中和劑選擇試驗(yàn)結(jié)果可適用于載體試驗(yàn)中, 故試驗(yàn)用歐洲標(biāo)準(zhǔn)懸液法進(jìn)行。試驗(yàn)設(shè)6組, 第l組到第5組, 皆將0.5 ml含牛血清白蛋白(SIGMA公司產(chǎn)) 3% (g/m1) 的去離子水溶液(過濾除菌后使用) 加入無菌試管中, 再加0,5 ml枯草桿菌黑色變種芽孢懸液, 混勻。然后, 第l、2組均加入4.0 ml消毒劑溶液(用標(biāo)準(zhǔn)硬水配制), 作用至預(yù)定時間, 第l組吸取0,5 ml加到含有4.5 ml PBS的試管中, 第2組吸取0,5 ml加到含有4 5 ml中和劑溶液的試管中; 第3組加入4.0 ml中和劑溶液, 作用 預(yù)定時間, 吸取0、5 ml加到含有4,5 ml中和劑溶液的試管中; 第4組加入4.0 ml中和產(chǎn)物(1份消毒劑溶液加4份中和劑溶液, 中和作用l0 min) 溶液,作用至預(yù)定時間, 吸取0.5 ml加到含有4.5ml中和產(chǎn)物溶液的試管中: 第5組加入4.0ml PBS, 作用至預(yù)定時間, 吸取0.5 ml加到含有4.5 ml PBS的試管中。第6組為中和劑溶液、中和產(chǎn)物溶液和胰蛋白胨大豆蛋白胨培養(yǎng)基(TSA)陰性對照。試驗(yàn)結(jié)果,以第l組不長菌或長菌量遠(yuǎn)低于第2組, 第2組長菌量不低于l00 cfu/ml, 第3、4、5組長菌量達(dá)5.0×l0 ~5.0×l0。cfu/ml且組間菌數(shù)相差不超過l0% , 第6組不長菌, 為所選中和劑合適。
      3、消毒劑檢測定量殺菌試驗(yàn)
      歐洲標(biāo)準(zhǔn)懸液定量殺菌試驗(yàn) 向試管內(nèi)加入0.5 ml含牛血清白蛋白3%(g/m1) 的去離子水溶液和0.5 ml枯草桿菌黑色變種芽孢懸液, 混勻, 再加入4.0 ml消毒劑溶液(陽性對照組為無菌蒸餾水),混勻并立即記時。作用至規(guī)定時間, 取0.5ml混懸液, 加于4.5 ml中和劑溶液中, 混勻。中和作用l0 min, 取0.5 ml該液或其稀釋液接種無菌平皿, 一式兩份。傾注l8~ 20 ml TSA 培養(yǎng)基, 混勻。置(37±1)℃培養(yǎng)72 h, 計(jì)數(shù)菌落數(shù), 計(jì)算殺滅率。
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